1.操作前應(yīng)對試驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18 C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗刷的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。
2.正確使用加樣器加樣器應(yīng)筆直參加標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次第要與說明書一起,否則可導(dǎo)致效果過錯(cuò),試驗(yàn)重復(fù)性差。
3.手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大,洗刷次數(shù)不要逾越說明書舉薦的洗刷次數(shù),洗液在反應(yīng)孑L內(nèi)停留的時(shí)間不宜太長。不要使洗液在孑L間竄流,形成孔問污染,導(dǎo)致假陰性或假陽性。
4.要保證加液量一起 我們在使用時(shí)感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量禁絕,形成顯色不一致,判別過錯(cuò)。
5.顯色液量不可過多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下,加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng),顯色液量不能過多,避免顯色過強(qiáng)。
為了減小過失,是先稀釋再加樣。而針對這位客戶所遇到的疑問,我公司技術(shù)人員是這樣說明的:
1. 前者測的是稀釋和移液的過失,后者只需移液過失。
2. 一般都是稀釋一次,分兩孔吧。同濃度的分復(fù)孔。
3. 由于是從同一原液稀釋,一般不考慮稀釋過失(稀釋過失是存在的),都是稀釋到想要的倍數(shù)直接分孔(而不是逐個(gè)稀釋,這樣可以使稀釋過失減小)。
4. 復(fù)孔是為了掃除移液體積,板的影響,以及其他系統(tǒng)過失的,要求復(fù)孔的濃度是一起的。稀釋后分孔能滿意此要求,逐個(gè)稀釋不能。