很多同學(xué)養(yǎng)細(xì)胞的手藝,都是從師兄師姐那里「?jìng)鞒小箒?lái)的,由于沒(méi)有辦法做到絕對(duì)的無(wú)菌,所以從經(jīng)驗(yàn)角度出發(fā),前輩們都會(huì)告訴剛開(kāi)始養(yǎng)細(xì)胞的同學(xué),可以在配制培養(yǎng)基的時(shí)候,加入1%左右的雙抗,防止細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)菌污染(有些時(shí)候甚至出現(xiàn)離開(kāi)抗生素,細(xì)胞沒(méi)過(guò)幾天立馬就被污染的情況)。
這就造成一些小伙伴在培養(yǎng)基中「預(yù)防性添加抗生素」,其實(shí)圖的就是個(gè)心安,抱著「有了抗生素就不怕污染」的心態(tài)。但事實(shí)上,抗生素并不是「免死金牌」,真菌、支原體這些污染是它不能夠?qū)沟?,甚至濫用還會(huì)適得其反。
這抗生素對(duì)細(xì)胞有什么影響呢?
早在十幾年前,就有很多報(bào)導(dǎo)指出β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素及氨基糖甙類(lèi)抗生素,對(duì)真核細(xì)胞培養(yǎng)有抑制增殖作用[1]。并且這種抑制增殖作用在原代細(xì)胞和干細(xì)胞等難養(yǎng)細(xì)胞上尤其明顯[2-3]。2017年,加州大學(xué)Nadav Ahituv博士在Scientific Reports上發(fā)表文章,呼吁在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中減少抗生素的使用[4]。他們發(fā)現(xiàn)抗生素(雙抗:青霉素和鏈霉素)的使用影響人體肝細(xì)胞中基因表達(dá)與基因調(diào)控。其中有209個(gè)基因的表達(dá)發(fā)生了改變,特別是與藥物和應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)的基因。超過(guò)9,500個(gè)基因調(diào)控元件發(fā)生了變化,并且很多調(diào)節(jié)元件位于參與細(xì)胞分化,核酸酶活性和tRNA修飾的基因附近。雖然這些基因的數(shù)量在龐大的細(xì)胞基因庫(kù)中不值一提,但這絕對(duì)不是一個(gè)應(yīng)該被忽略的事件。
雖然抗生素對(duì)真核細(xì)胞生長(zhǎng)的影響機(jī)制至今尚未明確,但是為了細(xì)胞更好的生長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更加穩(wěn)定,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中盡量不要隨意使用。