簡(jiǎn)要描述:
肉桂醇脫氫酶(CAD)測(cè)試盒是木質(zhì)素生物合成途徑中的關(guān)鍵酶之一,是木質(zhì)素單體合成反應(yīng)中的最后一步,催化多種不同的肉桂醛(香豆醛、芥子醛以及松柏醛等)生成與之相應(yīng)的肉桂醇。
更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:760
商品詳情:
肉桂醇脫氫酶(CAD)測(cè)試盒測(cè)定意義:
CAD是木質(zhì)素生物合成途徑中的關(guān)鍵酶之一,是木質(zhì)素單體合成反應(yīng)中的最后一步,催化多種不同的肉桂醛(香豆醛、芥子醛以及松柏醛等)生成與之相應(yīng)的肉桂醇。該酶多存在于高等植物、酵母、菌類中,研究該酶可以探討多種生物細(xì)胞發(fā)育過程中木質(zhì)素沉積的代謝機(jī)理,為減少水果石細(xì)胞含量提高其品質(zhì)提供依據(jù)。
貨號(hào) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 |
YSH3388 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3388-1 | 50管/48樣 | 紫外分光光度法 |
測(cè)定原理:
CAD催化肉桂醇和NADP生成肉桂醛和NADPH,在340nm下測(cè)定NADPH生成速率,即可反映CAD活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提取:
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測(cè)。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
3.血清等液體:直接檢測(cè)。
計(jì)算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測(cè)定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
Dermokine蛋白ELISA試劑盒 DMKN免費(fèi)代測(cè)試劑
Derlin3蛋白ELISA試劑盒 DERL3免費(fèi)代測(cè)試劑
Derlin2蛋白ELISA試劑盒 DERL2免費(fèi)代測(cè)試劑
Derlin1蛋白ELISA試劑盒 DERL1免費(fèi)代測(cè)試劑
Dendrin蛋白ELISA試劑盒 DDN免費(fèi)代測(cè)試劑
DEK癌基因ELISA試劑盒 DEK免費(fèi)代測(cè)試劑
DEAD框肽5ELISA試劑盒 DDX5免費(fèi)代測(cè)試劑
dCMP脫氨酶ELISA試劑盒 DCTD免費(fèi)代測(cè)試劑
Dachsous2蛋白ELISA試劑盒 DCHS2免費(fèi)代測(cè)試劑
Dachsous1蛋白ELISA試劑盒 DCHS1免費(fèi)代測(cè)試劑
D2-羥基戊二二乙酯脫氫酶ELISA試劑盒 D2HGDH免費(fèi)代測(cè)試劑
C-型凝集su域家族4成員KELISA試劑盒 CLEC4K免費(fèi)代測(cè)試劑
C-型凝集su域家族3成員BELISA試劑盒 CLEC3B免費(fèi)代測(cè)試劑
C-型凝集su域家族2成員CELISA試劑盒 CLEC2C免費(fèi)代測(cè)試劑
C-型凝集su域家族11成員AELISA試劑盒 CLEC11A免費(fèi)代測(cè)試劑
肉桂醇脫氫酶(CAD)測(cè)試盒100管/48樣合成酶(GS)測(cè)試盒/微量法
50T/48樣酶(GLS)測(cè)試盒/比色法
50管/48樣酶(GLS)測(cè)試盒/分光光度法
100管/96樣酶(GLS)測(cè)試盒/微量法
50管/24樣谷丙轉(zhuǎn)氨酶/氨基轉(zhuǎn)氨酶(GPT/ALT)測(cè)試盒/分光光度法
100管/48樣谷丙轉(zhuǎn)氨酶/氨基轉(zhuǎn)氨酶(GPT/ALT)測(cè)試盒/微量法
50管/24樣谷草轉(zhuǎn)氨酶/天冬氨氨基轉(zhuǎn)氨酶(GOT/AST)測(cè)試盒/分光光度法
100管/48樣谷草轉(zhuǎn)氨酶/天冬氨氨基轉(zhuǎn)氨酶(GOT/AST)測(cè)試盒/微量法
100管/48樣—S 轉(zhuǎn)移酶(GST)測(cè)試盒/比色法