簡要描述:
NADH氧化酶(NOX)測試盒廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,可在氧氣存在下,直接將NADH氧化為NAD。該酶不僅參與NAD的再生,而且與免疫反應(yīng)密切相關(guān)。
更新時間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1066
商品詳情:
NADH氧化酶(NOX)測試盒測定意義:
NOX(EC 1.6.99.3)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,可在氧氣存在下,直接將NADH氧化為NAD。該酶不僅參與NAD的再生,而且與免疫反應(yīng)密切相關(guān)。
測定原理:
NOX能夠?qū)ADH氧化為NAD,NADH的氧化與2,6二氯酚靛藍(lán)(DCPIP)的還原相偶聯(lián),藍(lán)色的DCPIP被還原為無色的DCPIP,在600nm下測定藍(lán)色DCPIP的還原速率計算出NADH氧化酶活性的大小。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃避光保存。臨用前加入667μL無水乙醇,蓋緊后充分混勻,再加入9.333 mL蒸餾水混勻,避光保存。
試劑四:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水,充分溶解。
標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1瓶,臨用前加10 mL蒸餾水,充分溶解。1μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液,4℃避光保存。
商品屬性:
貨號 | 規(guī)格 | 檢測方法 |
YSH3225 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3225-1 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 |
測定操作:
1. 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到570 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸餾水,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測定吸光值,記為A空白管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測完。
3. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入10μL標(biāo)準(zhǔn)品,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測定吸光值,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測完。
4. 測定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測定吸光值,記為A測定管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測完。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需要測定一次。
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